離子交換層析檢測儀是利用樣品中帶電分子與色譜基質(zhì)固定相中帶相反電荷的部分之間的相互作用。這種類型的分離很難使用其他技術(shù)，因為電荷很容易被所用緩沖液的pH值控制。兩種類型的離子交換分離總體來說是陽離子交換和陰離子交換。在交換過程中若是陰離子互換為固定相帶+電荷，相反在陽離子互換過程中，固定相帶負電荷。
離子交換層析是利用生物樣品中多種組分因自身不同的電負性而與離子交換劑產(chǎn)生不同的結(jié)合力，并通過改變洗脫液的離子強度，改變各組分與離子交換劑的結(jié)合力，而達到分離純化的目的。一般常用梯度洗脫法，即在洗脫的過程中逐步、連續(xù)增大洗脫液的離子強度，依次將各組分洗脫下來。
離子交換層析檢測儀與梯度混合器配合，可以產(chǎn)生離子強度呈線性梯度變化的洗脫液；在線檢測生物樣品隨洗脫液中離子強度改變的洗脫峰。通過改變線性梯度的斜率和其他一些條件，克服洗脫峰峰形過寬、拖尾和重疊現(xiàn)象，得到分辨率較好的分離效果。
1、離子交換層析分為哪幾種？
離子交換層析可以根據(jù)配基的不同可以分為陽離子交換層析和陰離子交換層析。陽離子交換柱可以吸附帶正電荷的蛋白，陰離子交換柱可以吸附帶負電荷的蛋白。
2、選陽離子還是陰離子？
蛋白是兩性分子，具有等電點PI。當(dāng)緩沖液的PH值低于蛋白等電點PI，蛋白帶正電，選陽離子交換柱；當(dāng)緩沖液的PH值高于蛋白等電點PI，蛋白帶負電，選陰離子交換柱。
3、強和弱的區(qū)別？
強離子交換劑載量在很寬的PH范圍內(nèi)保持恒定，弱離子交換劑載量會隨著PH而變化。強離子交換劑，當(dāng)選擇性不夠好時，嘗試弱離子交換劑。
4、如何選擇緩沖液PH值？
建議選擇PH6-8的中性緩沖液。可以使用和等電點相差1個PH的緩沖液作為初始嘗試，如果要達到最好分離效果，一般需要摸索PH條件。
